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                    當前位置:首頁產品展示合作品牌白介素-6受體ELISA KIT?

                    • 白介素-6受體ELISA KIT?

                    白介素-6受體ELISA KIT?
                    產品簡介:

                    白介素-6受體ELISA KIT?,運用雙抗夾心 ELISA 技術,可精準定量血清等樣本中的白介素 - 6 受體,操作便捷,助力科研。

                    產品型號:

                    更新時間:2025-07-04

                    廠商性質:生產廠家

                    訪 問 量 :2869

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                    白介素-6受體ELISA KIT

                    白介素-6受體ELISA KIT是科研中用于定量檢測生物樣本里白介素 - 6 受體含量的工具。IL-6R 在免疫調節、炎癥反應進程里作用關鍵,檢測其含量對相關研究意義重大。


                    1. 檢測原理:試劑盒多采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附測定法。在酶聯板上預包被針對 IL-6R 的特異性抗體。加入樣本后,樣本中的 IL-6R 與固相抗體特異性結合。接著加入酶標記的抗 IL-6R 抗體,其與已結合在固相抗體上的 IL-6R 形成 “固相抗體 - IL-6R - 酶標抗體" 復合物。經過充分洗滌去除未結合物質,加入底物溶液(如 TMB),在酶的催化下,底物發生顯色反應,顏色深淺與樣本中 IL-6R 的含量成正比。通過酶標儀在特定波長(一般為 450nm)下測量吸光度,與標準曲線對比,計算出樣本中 IL-6R 的濃度 。

                    2. 試劑盒組成

                      • 酶聯板:96 孔或 48 孔,已預包被抗 IL-6R 抗體,是反應發生的載體 。

                      • 標準品:一般為凍干品,有 2 瓶。臨用前需用標準品稀釋液復溶,并稀釋成不同濃度梯度,如 0、31.2、62.5、125、250、500、1000 pg/mL 等,用于繪制標準曲線 。

                      • 樣本xi釋液:用于稀釋濃度過高的待測樣本,確保樣本濃度處于試劑盒檢測范圍內 。

                      • 酶標抗體:即 HRP 標記的抗 IL-6R 抗體,為濃縮液,使用時需按要求用酶標抗體稀釋液稀釋 。

                      • 酶標抗體xi釋液:專門用于稀釋酶標抗體 。

                      • 底物溶液:如 TMB 底物,可與酶標抗體中的 HRP 發生反應,產生顏色變化 。

                      • 洗滌液:通常為濃縮液,使用時需按比例用蒸餾水或去離子水稀釋,用于洗滌酶聯板,去除未結合的物質,降低背景干擾 。

                      • 終止液:多為強酸溶液(如硫酸),用于終止底物的顯色反應,使反應液顏色穩定,便于讀數 。

                      • 封板膜:用于在溫育過程中覆蓋酶聯板,防止液體蒸發和外界污染 。

                      • 使用說明書:詳細介紹試劑盒的使用方法、注意事項、性能指標等 。

                    3. 樣本要求

                      • 血清:采集血液后,室溫放置 2 小時或 4℃過夜,隨后以 1000×g 離心 20 分鐘,取上清備用。采血應使用無熱原、無內毒素的一次性器材 。

                      • 血漿:可用乙二胺四乙酸(EDTA)、肝素等作為抗凝劑。樣本采集后 30 分鐘內,在 2 - 8℃下以 1000×g 離心 15 分鐘,取上清 。

                      • 細胞培養上清:將細胞培養上清以 1000×g 離心 20 分鐘,去除細胞碎片和雜質后,取上清用于檢測 。

                      • 組織勻漿:用預冷的磷酸鹽緩沖液(PBS,0.01M,pH = 7.4)沖洗組織,去除殘留血液。剪碎組織后,按照約 1:9(w/v)的比例加入 PBS,在冰上充分研磨。再經 5000×g 離心 5 - 10 分鐘,取上清用于檢測 。

                      • 樣本采集后若短期內檢測,可保存于 4℃;若需長時間保存,需置于 - 20℃或 - 80℃凍存,且要避免反復凍融,溶血樣本一般不適合用于檢測 。

                    4. 操作流程

                      • 準備工作:從冰箱取出試劑盒,提前 30 分鐘使其平衡至室溫。同時,將濃縮洗滌液按要求比例用蒸餾水或去離子水稀釋備用 。

                      • 加樣:設置空白孔、標準品孔和樣本孔。空白孔加入樣本xi釋液,標準品孔加入不同濃度的標準品,樣本孔加入處理好的樣本,每孔加樣量通常為 100μL,輕輕混勻,37℃溫育 90 分鐘 。

                      • 洗滌:溫育結束后,棄去孔內液體,用洗滌液加滿各孔,浸泡 1 - 2 分鐘后甩干,重復洗滌 5 次,確保che底洗凈未結合物質 。

                      • 加酶標抗體:每孔加入 100μL 稀釋好的酶標抗體工作液,37℃溫育 60 分鐘 。

                      • 再次洗滌:重復上述洗滌步驟 。

                      • 顯色:每孔加入 90μL 底物溶液,輕輕混勻,37℃避光顯色 15 - 30 分鐘(需根據實際顯色情況判斷) 。

                      • 終止反應:每孔加入 50μL 終止液,此時溶液顏色由藍色變為黃色 。

                      • 讀數:在加終止液后 15 分鐘內,用酶標儀在 450nm 波長處測量各孔的吸光度(OD 值) 。

                      • 計算結果:以標準品濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,繪制標準曲線。根據樣本的 OD 值從標準曲線中查出對應的濃度,若樣本進行了稀釋,需乘以相應的稀釋倍數,從而得到實際濃度 。

                    5. 性能指標

                      • 檢測范圍:不同試劑盒有所差異,常見的檢測范圍為 31.2 - 2000 pg/mL 等區間,可滿足多種樣本中 IL-6R 含量的檢測需求 。

                      • 靈敏度:一般可低至 15.6 pg/mL 甚至更低,能夠檢測到樣本中微量的 IL-6R 。

                      • 特異性:對 IL-6R 具有高度特異性,與其他細胞因子受體等物質幾乎無交叉反應 。

                      • 重復性:板內變異系數一般小于 10%,板間變異系數小于 15%,保證了檢測結果的穩定性和可靠性 。

                    6. 注意事項

                      • 嚴格依照說明書操作,不同批次試劑盒的試劑不可混用 。

                      • 操作時使用一次性吸頭,防止交叉污染,加樣務必精準 。

                      • 充分洗滌是保證結果準確的關鍵,洗板不che底易導致假陽性結果 。

                      • 底物溶液對光敏感,需避光保存和使用,顯色反應要在避光條件下進行 。

                      • 終止液具有腐蝕性,操作時注意做好防護,避免接觸皮膚和眼睛 。

                      • 建議標準品和樣本均做復孔檢測,以提高結果的準確性 。該試劑盒僅用于科研用途,不可用于臨床診斷 。


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